Carbonated water and necro-apoptotic cell death in chicken embrio low limb / Agua carbonatada y la muerte celular por necro-apoptosis en miembro inferior de embrión de pollo

Carbonated water is a fundamental part of many drinks and its effects have been studied in many pathological situations. However, cells and tissue damage as a consequence of carbonated water has not been the subject of extensive research. We assessed the short-term effects of soda on in vitro Hanging-drop culture of myoblasts and ex vivo lower limb of 8-day-old chicken embryo skeletal muscle tissue. Several groups weren designed: a) Control (Con-tyr), b) Carbonated water (Car), c) Coffe (Caf), and d) Cola beverage (Glu). The samples were observed with light microscopy and digital imaging analysis was performed. The ultra-structure of control and treated tissue were observed with electron microscopy. Immunohistochemistry techniques, such as terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick- end labeling (TUNEL), TACTS Blue Label (TdT Kits) of R&D Systems were used. The myoblasts monolayers treated with soda showed plenty of eosinophilics elements. The eosinophily corresponds to higher percentage of cell death. The muscular tissue of the low limb treated with carbonated water (Car) showed calcium phosphate and collagen decreases, 53,86% and 82,95% respectively and enlarged nuclei of a higher size, with an evident loss of the parallel arrangement and fragmented nuclei. Compared to control samples, the muscular disorganization was accompanied by a positive reaction of the apoptotic bodies on TACS, also a positive reaction to ApopTacg and another positive reaction for the metalloproteases in the inter fibrillar cartilage matrix. These changes were not significant in Tyrode's solution controls, Coffee and Cola beverage groups. The morphological outcome can be apoptosis, necrosis or a mixed phenotype, suggesting that the carbonated water toxic effect might be related to these cell death processes. Further research, exploring biochemical factors will be required to elucidate necro-apoptotic cell death induced by carbonated water.

El agua carbonatada constituye una parte fundamental en muchas bebidas y su efecto ha sido estudiado en muchas situaciones patológicas. Sin embargo, el daño celular y de tejido como consecuencia del agua carbonatada no ha sido claramente investigado. El presente trabajo evalúa el efecto agudo in vitro de la soda sobre mioblastos obtenidos por cultivos en gota pendiente y el efecto sobre tejido muscular esquelético in vivo del miembro inferior de pollo de 8 días de desarrollo. Cuatro grupos de embriones fueron seleccionados al azar: a) Control (Con-tyr), b) Agua Carbonatada o Soda Club (Car), c) Café (Caf) y d) Bebida de cola (Glu). Las muestras fueron observadas por microscopía de luz. El análisis de imágenes digitales fue realizado. La ultraestructura del tejido control y tratado fue observada con Microscopía Electrónica de Transmisión (MET). La determinación de apoptosis fue realizada a través de TUNEL y l TACS Blue Label. La actividad de metaloproteasa MMP-1 fue ensayada. La población de mioblastos tratados con Soda Club mostró un elevado número de elementos eosinofílicos interpretado como un elevado número de células muertas, a diferencia del control y el grupo tratado con cafeína y bebida de Cola. En el tejido muscular se determinó una reducción de fosfatos de calcio y fibras de colágeno en una proporción de 53,86% y 82,95% respectivamente, acompañada por un desarreglo de las fibras y núcleos fragmentados, con reacción positiva para cuerpos apoptóticos y metaloproteasas en la matriz interfibrilar. Los resultados sugieren que el efecto tóxico del agua carbonatada sobre células y tejido pudiera estar vinculado con procesos combinados de muerte celular como necro-apoptosis. Se sugiere una mayor exploración de los eventos moleculares para dilucidar la combinación de los procesos de muerte celular sugerida en el presente trabajo.

Ventricular myosin light chain-2 gene expression in developing heart of chicken embryos

Recent gene knock-out studies in mice have suggested that ventricular myosin light chain-2 (vMLC2) has a role in the regulation of cardiogenic development and that perturbation in expression of vMLC2 is linked to the onset of dilated cardiomyopathy. In an attempt to develop an avian model for such studies, we examined the expression pattern of vMLC2 in chicken embryos at various stages and analyzed the effect of antisense oligonucleotide-mediated interference of vMLC2 function in cultures of whole embryos. Our results showed vMLC2 to be a specific marker for ventricular chamber throughout chicken embryonic development and antisense vMLC2 treatment of primitive streak stage (stage 4) embryos to produce pronounced dilation of heart tube with severe deficiency in formation of striated myofibrils. Further studies with antisense mRNA techniques of whole embryo cultures should, therefore, be useful to evaluate the role of vMLC2 and other putative regulatory factors in cardiac myofibrillogenesis.

Potencialidades tecnológicas do embrião de galinha

Este trabalho reúne informações sobre potencialidadestecnológicas do embrião de galinha. As informações foram obtidas pelos autores em dois anos de pesquisa naUFSC. A falta de informação neste assunto sugere um enorme campo de pesquisa a ser prosseguido nesta área

Efecto de la D-Carnitina sobre la arquitectura ventricular de corazón de embrión de pollo: estudio estructural y ultraestructural / Effects of D-Carnitine in the myoarchitecture of the chick embryo heart ventricular region

Objetivo:El presente trabajo estudia, a nivel estructural y ultraestructural, el efecto de D-carnitina sobre la arquitectura ventricular de corazón de embrión de pollo de 5 días de desarrollo .Métodos: Se disecaron corazones a partir de embriones de cinco díasde desarrollo tratados con D-carnitina (6mg./Kg. de peso). Los controles fueron obtenidos a partir de embriones tratados con solución salina isotónica. Las muestras controles y tratadas fueron fijadas, post-fijadas, deshidratadas, infiltradas, incluidas y polimerizadas. Para el análisis en microscopia de luz (ML), se realizaron cortes gruesos teñidos con azul detoluidina y para microscopia electrónica de transmisión (MET)cortes finos contrastados con acetato de uranilo y citrato de plomo. Para microscopia electrónica de barrido (MEB), las muestras , fueron desecadas y cubiertas con oro para ser observadas en un microscopio de barrido (Hitachi-300) a 20 Kvolt de aceleración. Resultados:En los corazones tratados con D-carnitina disminuye:el espacio subepicárdico, el grosor del miocardio ventricular y del septum interventricular primitivo. La región ventricular carece de apariencia cónica, pierde la estrechez caudal y el ápice exhibe un patrón trabecular homogéneo. Se observa una arquitectura ventricular de apariencia esponjosa. Resalta la infiltración grasa ó presencia de gotas de lípidos en el interior de los miocitos. Conclusiones:D-carnitina cambia el patrón de estructuración normal del corazón embrionario. Se sugiere que L-carnitina actúa como factor regulador de la relación existente entre la anatomía y el metabolismo cardíaco

Morphometric relationships between satellite and nerve cells in the sensory lumbar ganglia of the domestic fowl in different pre-and post-hatching stages

Foi feito um estudo combinado a microscopia óptica e eletrônica em embriöes de 10 a 18 dias e em espécimens de 8, 35, 61, e 120 dias após a eclosäo de galo doméstico. O volume nuclear da célula nervosa, praticamente näo varia após o 18ª dia de incubaçäo enquanto que, considerável aumento do mesmo volume para células satélites foi observado. O volume citoplasmático varia intensa e progressivanebte para ambos os tipos de células, sendo menor para célula nervosa. Há relativa proporcionalidade de aumento de volume para ambos os tipos de células, sendo contudo, mais intenso para células satélites. Säo feitas consideraçöes de ordem morfofuncional